細胞嵌入皿

如何選擇嵌入皿小室產品的孔徑？

首先需要明確您所進行的應用是否需要細胞穿過小室膜上的孔。一般來說，共培養(yǎng)實驗、Caco-2 Transport實驗及構建細胞極化模型等不需要細胞穿膜，大多選擇0.4μm等小孔徑的產品。而在細胞遷移實驗及侵襲實驗中，細胞則需要穿過上室的膜、到達膜的背側（少數(shù)情況下會落至下室中，如懸浮細胞的遷移/侵襲實驗），因此需要選擇較大孔徑，（如腫瘤細胞的遷移、侵襲實驗常選擇8μm孔徑的產品）。

如何挑選小室膜的材質？

潔特小室有聚碳酸酯（Polycarbonate, PC），聚酯（Polyesteror PolyethyleneTerephthalate，PET）兩種膜材質。

PC和PET膜材質應用都很廣泛，二者的主要區(qū)別在光透性方面，即PC膜半透明，不太方便在培養(yǎng)的過程中觀察上室細胞的形態(tài)；PET膜透明，方便在相差顯微鏡下觀察細胞的狀態(tài)。

另外，在0.4μm孔徑下，PC膜和PET膜的孔密度（單位面積上的孔數(shù)量）不同，PC膜提供更高的膜孔密度。您可根據(jù)對實驗的要求（是否需要觀察細胞狀態(tài)，是否需要更高孔密度的膜）來選擇。

小室的膜材質與細胞培養(yǎng)皿/瓶不同，細胞貼壁情況會有什么差異嗎？

未包被的小室膜材質（PC或PET）雖與普通塑料細胞培養(yǎng)皿/瓶的材質（Polystyrene, PS）不同，但膜的兩側均經過組織培養(yǎng)表面處理（TissueCulture Treated, TC Treated），與一般做細胞培養(yǎng)的PS耗材的表面處理相同。因此，在正常情況下，細胞在小室內的貼壁情況應與培養(yǎng)皿/瓶中類似。在普通培養(yǎng)時需包被基質蛋白等輔助貼壁的細胞，在小室上仍然需要包被。包被方法類似普通培養(yǎng)表面，可通過小室膜表面積換算所需包被液的量

小室產品可否滅菌后重復使用？

小室產品為一次性使用的耗材，不可重復使用。小室的孔板和膜的材質均無法承受高壓蒸汽滅菌，且無法確認重復使用的小室是否被徹底清潔，因此無法保障重復使用的實驗效果。

嵌入皿小室是否需要匹配特殊的接收板/下室產品?

與相應規(guī)格的普通細胞培養(yǎng)多孔板（如TCP010006、TCP010012、TCP010024等）適配。

在接種細胞前，是否需要進行“水化”？

大多數(shù)應用并不需要額外進行“水化”操作，該操作主要用于Matrigel預包被的侵襲小室，在使用前需平衡至室溫，并加入預溫至37攝氏度的無血清培養(yǎng)基，于培養(yǎng)箱中水化兩小時。

少數(shù)情況下，提前在上下室加入培養(yǎng)基，并在培養(yǎng)箱中預孵育大于1小時可幫助細胞貼壁，但大多數(shù)細胞可以直接接種。

接種細胞的加液順序如何？

一般先將預熱的培養(yǎng)基加入多孔板的孔中（下室），再輕輕將小室放入孔中。在放入時，建議將小室稍稍傾斜，一側先接觸液面，以免垂直放入在小室下生成氣泡。之后便可將混合均勻的細胞懸液加入小室內部。

小室膜上既然有許多小孔，在包被基質蛋白或一些單獨加液在上室的情況下，液體是否會很快漏至下室？

一般不會。小室的膜上的小孔孔徑有限，在表面張力的作用下，加入上室的包被液并不會很快漏下，如果短時間內發(fā)現(xiàn)有液體大量滴下，需檢查小室的膜是否有裂痕或不完整的情況。

共培養(yǎng)實驗中，上下室接種細胞的位置一般如何安排？

由于小室膜上小孔的存在，上下室的培養(yǎng)基可以交流互通，接種在上下室的細胞是相互影響的。接種細胞的位置安排需考慮收集細胞、進行下游檢測的方便程度，同時也需要考慮到上下室培養(yǎng)面積的差異（上室的有效生長面積比下室小，相應地，接種的細胞量恐怕有差異），您可參考相關文獻或進行預實驗來最終決定實驗安排。

小室內接種的細胞可否消化收集？

可以的。您可采用在普通培養(yǎng)器皿中消化相應細胞的試劑（如胰酶等），在上下室均加入推薦體積的消化液。

對小室內接種的細胞進行藥物處理時，藥物是僅需加入上室嗎？

由于小室膜上小孔的存在，我們建議您在上下室內均加入含有同樣濃度藥物的培養(yǎng)基，以確保您的藥物處理濃度。

我們的耗材都是無DNA酶，無RNA酶并且無熱原嗎？
 
通常我們的產品都是無DNA酶，無RNA酶且無熱原的，但其他品類有個別產品可能不包含這些檢測項目，還請參考相應產品的質檢文件（COA）。

潔特有DEPC處理的耗材嗎？
 
DEPC處理是為了讓耗材不攜帶核酸酶，而潔特的耗材都是無DNA酶，無RNA酶的。這是基于我們從原料開始控制生產流程的結果。最終產品我們對核酸酶進行質量檢測，而不會額外加入DEPC處理步驟。其產品應用與DEPC處理過的耗材是一致的，潔特產品可以代替DEPC處理耗材使用于分子生物學實驗中。

如何恰當儲存潔特耗材產品？
 
除非有特別要求，一般潔特耗材產品應存放于干燥的室溫環(huán)境，注意避開紫外，臭氧，廢氣，煙霧等極端條件。部分有特殊存儲要求的產品會在外箱標簽標示，敬請留意。

如果您購買的是特定的培養(yǎng)容器，建議查看產品說明書獲取準確的生長面積和推薦的培養(yǎng)基添加量。同時，不同細胞類型對培養(yǎng)基的需求和接種密度也有所不同，培養(yǎng)時所需的培養(yǎng)基成分、接種量和培養(yǎng)條件都可能存在差異，還需要根據(jù)細胞的具體種類進行調整。

TC-treated 就是組織培養(yǎng)（Tissue Cultured）處理表面的意思，潔特通過電暈放電或氣體等離子的手段提升聚苯乙烯（PS）表面的親水性，改善細胞貼壁所需蛋白的粘附情況從而幫助細胞貼壁。

懸浮細胞沒有細胞貼壁的需求，一般使用未處理表面培養(yǎng)耗材即可。TC處理表面也可培養(yǎng)懸浮細胞，但根據(jù)細胞的狀態(tài)和種類，可能會有一些細胞出現(xiàn)貼壁的現(xiàn)象

您可以選擇未處理表面的培養(yǎng)器皿自行包被細胞外基質。當然這種情況下TC處理表面的器皿也是可以使用的。